ЭЛЕКТРОННАЯ МИКРОСКОПИЯ
(Electron microscopy)
- метод изучения объектов в потоке электронов высокой энергии с очень малой длиной волны, что достигается в специальном приборе — электронном микроскопе. Современный просвечивающий электронный микроскоп обеспечивает увеличение объекта до 10 6 соответственно, предел разрешения составляет 6—10 A (1a = 10 -10 м). Такое разрешение достаточно для выявления (визуализации) вирусов, их отдельных структурных компонентов и крупных молекул, например, ДНК. Поскольку электронный поток взаимодействует с объектом в условиях глубокого вакуума, требуется особая обработка исследуемого материала, принципиально состоящая в его высушивании со всеми предосторожностями во избежание деформации. С целью повышения контрастности малых и недостаточно плотных структур используются некоторые способы дополнительной обработки препаратов, предназначенных для электронно-микроскопической визуализации. К ним относятся:
- т. н. негативное контрастирование, обычно с помощью солей фосфовольфрамовой кислоты (ФВК), создающее однородный электрононепроницаемый фон, на котором такие объекты, как вирионы, четко выделяются в деталях;
- напыление солями тяжелых металлов, которое делает непроницаемыми все структурированные частицы в препарате;
- импрегнирование материала, в частности срезов ткани, веществами, содержащими атомы тяжелых металлов (уранилацетат, четырехокись осмия, гидроокись свинца), которые соединяясь с поверхностно расположенными молекулами, сильно рассеивают электроны.
Электронная микроскопия особенно важна при определении таксономической принадлежности вируса, т.к. дает представление о морфологическом строении вириона. Она продолжает широко применяться в исследовательской работе с вирусами гепатитов.