ИММУНОЭЛЕКТРОННАЯ МИКРОСКОПИЯ, ИЭМ
(Immune electron microscopy)
представляет собой непосредственную визуализацию взаимодействия антигена и антител методом электронной микроскопии, была впервые предложена для вирусологических исследований Дж. Альмейда и А. Ватерсоном в 1969г.
Методически тест ИЭМ выполняется в следующей последовательности:
- материал, в котором предполагается наличие искомого вируса, смешивается и инкубируется со стандартной иммунной сывороткой;
- комплекс вирус-антитело осаждается центрифугированием в подходящих для него режимах;
- к ресуспендированному осадку добавляется контрастирующее вещество, и полученный препарат исследуется под электронным микроскопом.
В случае положительной реакции выявляются характерные агрегаты, состоящие из вирусных частиц, соединенных между собой мостиками из антител. Порог чувствительности ИЭМ невысок: надежное выявление вируса осуществимо, когда его концентрация в исходном материале составляет 10^4 — 10^6 частиц в мл. Преимуществом метода является возможность оценивать не только исход серологической реакции, но и идентифицировать ее морфологический субстрат, т.е. определить форму и размер вирусных частиц. При наличии препаратов вируса с известным содержанием частиц ИЭМ может применяться и для количественного определения антител в сыворотках, для чего предложена специальная система учета интенсивности взаимодействия вируса и антител.
На начальных этапах работы с вирусными гепатитами ИЭМ широко использовалась в диагностических и исследовательских целях; с ее помощью, в частности, были идентифицированы вирус гепатита А и вирус гепатита Е. После появления новых, более практичных, тестов для массовых исследований клинических материалов диагностика гепатитов с помощью ИЭМ постепенно утратила свое значение, но ее возможности по-прежнему ценны для характеристики морфологически отличных от вируса антигенов или каких-либо ранее неизвестных вирусных агентов.
